高壓蒸汽滅菌鍋驗證-消毒滅菌效果驗證

高壓蒸氣滅菌器使物品滅菌后達到無菌要求，這是藥品實驗的基本保證。高壓滅菌器滅菌效果是否合格是實驗成敗的基礎最關鍵的首要步驟。除少數培養基只需加熱溶解，不需高壓滅菌外，大部分培養基均需121℃高壓滅菌15-30分鐘。尤其是對無菌試驗培養基滅菌不成功，直接關系到對藥品的無菌試驗結果。因此必須認真對高壓滅菌器進行滅菌效果的驗證。為此我們提供了進行滅菌效果驗證的一個簡易可行的方法。

高壓蒸汽滅菌鍋驗證-消毒滅菌效果驗證  試驗材料

生物指示劑：菌片和培養基混合指示管采用嗜熱脂肪桿菌芽孢（ATCC 7953常用的生物指示菌）和溴甲酚紫蛋白胨恢復培養基組成，根據培養后的顏色變化來判斷壓力蒸汽滅菌是否合格。本品芽孢含量為5.0×10^5cfu/支～5.0×10^6cfu/支，121℃壓力蒸汽滅菌死亡時間不超過19分鐘，存活時間不少于3.9分鐘。

適用于121℃下排氣壓力蒸汽和132℃預真空壓力蒸汽滅菌效果測試。

檢測方法

1 在壓力蒸汽滅菌生物指示劑表面的標簽空白處，記錄滅菌管理的必要事項（如：滅菌處理日期、操作人員等）

2 將壓力蒸汽滅菌生物指示劑置于標準試驗包（23cmX23cmX15cm）的中心部分，然后將標準測試包置于滅菌器排氣口的上方或生產廠家建議的滅菌器內Γ難滅菌的位置，運行滅菌程序。

3 滅菌處理后，將標準測試包中的生物指示劑取出，確認標簽上的化學指示油墨由黃色變成黑色后，放置15min以上冷卻至室溫。

4 用夾子將冷卻后的壓力蒸汽滅菌生物指示劑內部的安瓿瓶夾破，使菌片充分接觸培養基，確認菌片浸于培養基后及時培養。

5 請在56~58℃進行培養。另取一支同一批次未滅菌的壓力蒸汽滅菌生物指示劑，在夾破安瓿瓶后，同條件下進行培養作為陽性對照。

6 確認滅菌效果后，請將標簽取下粘貼在記錄簿留存。

【結果判定】

1、若恢復培養48H后，恢復培養基由紫紅色變成黃色，表示滅菌不合格。

2、若恢復培養48h后，恢復培養基的顏色保持紫紅色不變，則判斷滅菌合格。

3、以上兩種結果只有在對照管（培養不超過24小時）為陽性時其生物監測結果才算有效。